细胞工厂适用于大规格工业批量生产,主要培养细胞也为贴壁培养,其培养细胞为甲肝疫苗、乙肝疫苗、水痘疫苗等主要生产途径,但是我们在使用细胞工厂培养细胞时经常会发现细胞工厂内细胞不贴壁,那我们应该怎么做呢?
首先,细胞工厂培养细胞时如果出现不贴壁现象,其原因是多方面的,具体可以从以下几个方面分析解决:
胰蛋白酶消化过度:胰蛋白酶是帮助细胞进行消化的,如果消化过度会对细胞的活性将产生较大的损伤,并有细胞漂浮。可以通过缩短消化时间或降低胰蛋白酶浓度的办法进行控制。
支原体污染:细胞对环境比较敏感,如果操作人员不注意卫生、或工作环境及实验器材出现污染都会导致细胞间的交叉污染,出现不贴壁现象。如果发现支原体污染,及时丢弃培养物。
细胞老化:细胞老化(cellular aging)是细胞随生物体年龄增长而发生退行性变化的总和,如果传代前细胞已汇合就会导致其失去贴附性。可以复苏新的保种细胞,重新进行培养。
此外,如果接种细胞时的起始浓度太低或太高也会影响细胞的贴壁性能,调节好合适的接种细胞浓度可以解决这一问题。在使用细胞工厂前,操作人员要做好自身及环境的消毒工作,避免因各种污染影响细胞培养进程。
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